Respuesta anticlases mayores de anticuerpos humanos séricos en antisueros hiperinmunes obtenidos en carneros / Characterization of hyperimmune anti-human serum produced in sheep

Introducción: La inmunoelectroforesis es una técnica de precipitación que permite la caracterización de muestras biológicas complejas. En el Departamento de Inmunología del Instituto de Ciencias Básicas y Preclínicas Victoria de Girón se cuenta con un antisuero hiperinmune obtenido por inmunizaciones de carneros contra proteínas totales séricas humanas y con otro antisuero anti IgA de calostro humano. Objetivo: Identificar IgG, IgM e IgA en suero humano y determinar respuesta anti IgM humana en el antisuero anti IgA de calostro humano obtenido en carnero. Material y Métodos: Se realizó un estudio observacional, descriptivo y transversal desde noviembre de 2017 hasta junio de 2018. Se desarrolló una inmunoelectroforesis de suero humano normal empleando el antisuero hiperinmune. Resultados: Se identificaron IgG, IgM e IgA además de albúmina y otras fracciones proteicas y se determinó respuesta anti IgM humana en el antisuero anti IgA de calostro humano obtenido en carnero. Conclusiones: Este trabajo permitió identificar y determinar la respuesta anticlases mayores de inmunoglobulinas en la muestra de estudio(AU)

Introduction: Immunoelectrophoresis is a precipitation technique that allows the characterization of complex biological samples. The Immunology Department of the Institute of Basic and Pre-Clinical Sciences Victoria de Girón has a hyperimmune antiserum obtained by immunization of sheep against human serum total proteins and it also has an anti-human IgA antiserum obtained from human colostrum. Objective: The aim of this study was to identify IgG, IgM and IgA in human serum and to determine response to anti-human IgM in human colostral IgA with antiserum obtained in sheep. Material and Methods: An observational descriptive cross-sectional study was conducted from November 2017 to June 2018. Immunoelectrophoresis of normal human serum was performed using hyperimmune antiserum. Results: These procedures allowed to identify IgG, IgM and IgA in addition to albumin and other protein fractions and to determine response to anti-human IgM in human colostral IgA with antiserum obtained in sheep. Conclusions: This work allowed us to identify and determine significant anti-class responses of immunoglobulins in the sample studied(AU)

Obstrucción duodenal congénita de etiología múltiple: reporte de un caso con malrotación intestinal, bandas de Ladd y membrana duodenal intrínseca como causantes de obstrucción intestinal en el neonato / Congenital duodenal obstruction of multiple etiology: case report with intestinal malrotation, Ladd bands and intrinsic duodenal membrane as causes of intestinal obstruction in the neonate

Resumen: La obstrucción duodenal congénita agrupa un amplio espectro de anomalías en el desarrollo del intestino delgado; se clasifica según su etiología tanto en extrínseca como intrínseca. Su presentación es relativamente común, teniendo una incidencia de 1: 2.500-10.000 nacidos vivos y normalmente presenta asociación con aneuploidías (como la trisomía 21) y malformaciones cardíacas. Las imágenes tienen un papel importante en la aproximación diagnóstica y la radiografía de abdomen simple, es el primer escalón en la aproximación de la obstrucción intestinal. El tratamiento involucra una exploración quirúrgica del abdomen con corrección de los defectos encontrados. Este es un reporte de caso de un neonato que presentó obstrucción duodenal congénita de etiología tanto extrínseca (malrotacion intestinal y bandas de Ladd) como obstrucción intrínseca (membranas duodenales).

Abstract: Congenital duodenal obstruction groups together a broad spectrum of abnormalities in the development of the small intestine; it is classified according to its etiology as both extrinsic and intrinsic. Its presentation is relatively common, having an incidence of 1: 2.500-10.000 live births and it is normally associated with aneuploidy (such as trisomy 21) and cardiac malformations. Images play an important role in the diagnostic approach, with simple abdominal radiography being the first step in the approximation of intestinal obstruction. The treatment corresponds to a surgical exploration of the abdomen with resolution of the defects found. This is a case report of a newborn who presented congenital duodenal obstruction of both extrinsic etiology (intestinal malrotation and Ladd bands) and intrinsic obstruction (duodenal membranes).

Vacuna antitetánica adyuvada en alúmina en inmunización simultánea por vías mucosa y parenteral / Alum adjuvant tetanus vaccine in simultaneous immunization by mucosal and parenteral routes

El tétanos es causado por Clostridium tetani, bacteria Gram+ esporulada que produce una potente neurotoxina. Las vacunas parenterales producen IgG antitoxina tetánica (anti TT) protectores en múltiples dosis inductoras y de reactivación; vax-TET® es una vacuna cubana parenteral adsorbida en alúmina. La IgAS (secretora), principal anticuerpo protector mucoso, sólo es inducida por la vía mucosa. La vía oral, la inducción de IgA y su papel protector no han sido exploradas. SinTimVaS se aplica por vía mucosa y parenteral simultánea que induce IgG sistémica similares a la vía parenteral y adiciona de respuesta de IgA mucosa. Evaluamos el efecto de vax-TET® aplicado en SinTimVaS en ratones Balb/c y exploramos la influencia del adyuvante sobre la inducción de IgA anti TT. SinTimVaS indujo similares respuestas de IgG anti TT séricas que dos dosis de vax-TET® intramusculares; pero superiores a una dosis. Tres dosis de vax-TET® orales no indujeron IgG anti TT sérica, mientras que la adyuvación con el adyuvante Finlay Cocleato 1 (AFCo1) sí la indujeron. No se logró determinar la inducción de IgA anti TT mucosa con ninguna de las formulaciones adjuvadas con alúmina; pero si con la formulación AFCo1+TT. Podemos concluir que vax-TET® en SinTimVaS funcionó de forma similar a la inmunización parenteral establecida, por lo que sería posible reducir los esquemas multidosis con formulaciones de adyuvantes más potentes y se confirma que se requieren potentes adyuvantes para inducir IgA mucosa(AU)

Tetanus is caused by Clostridium tetani, a sporulated Gram+ bacterium that produces a potent neurotoxin. Parenteral vaccines produce protective tetanus antitoxin (anti TT) IgG in multiple induction and reactivation doses; vax-TET® is a Cuban parenteral vaccine adsorbed onto alumina. IgAS (secretory), the main mucosal protective antibody, is only induced by the mucous membrane. The oral route, the induction of IgA and its protective role have not been explored. SinTimVaS is applied by simultaneous mucosal and parenteral route that induces systemic IgG similar to the parenteral route and adds an IgA mucosal response. We evaluated the effect of vax-TET® applied in SinTimVaS in Balb/c mice and we explored the influence of adjuvant on the induction of anti-TT IgA. SinTimVaS induced similar serum anti TT IgG responses to two intramuscular doses of vax-TET®; but higher than one dose. Three doses of oral vax-TET® did not induce serum anti-TT IgG, whereas adjuvanted with adjuvant Finlay Cocleate 1 (AFCo1) did induce it. It was not possible to determine the IgA anti-TT mucous induction with any of the formulations adjuvanted with alumina; but with the formulation AFCo1 + TT it was induced. We can conclude that vax-TET® in SinTimVaS worked in a similar way to the established parenteral immunization, so it would be possible to reduce the multi-dose vaccination schemes with more potent adjuvant formulations and it is confirmed that powerful adjuvants are required to induce mucosal IgA(AU)

Proteína C reactiva y marcadores de estrés oxidativo como predictores de la corioamnionitis histológica y el parto pretérmino / CRP and oxidative stress markers as predictors of histological chorioamnionitis and preterm birth

Introducción: la determinación de biomarcadores que permitan el diagnóstico precoz de la corioamnionitis histológica y el parto pretérmino constituye un tema de interés debido a las complicaciones para la salud del recién nacido y la repercusión social que acarrean estas dos entidades. A pesar de los múltiples estudios llevados a cabo aún no se cuentan con biomarcadores que permitan la predicción de forma efectiva de ambas entidades. Objetivo: en la actual revisión bibliográfica se pretendió abordar la posible relación y uso en el diagnóstico de dos biomarcadores del suero materno: la proteína C reactiva y los marcadores de estrés oxidativo, con respecto a la corioamnionitis histológica y el parto pretérmino. Métodos: se realizó una búsqueda en las bases de datos Pubmed, SciELO, Hinari y Lilacs en relación con el tema. Resultados: a pesar que la proteína C reactiva en suero materno es empleada de forma rutinaria como un marcador en el seguimiento de la corioamnionitis clínica, en la literatura consultada existen estudios a favor y en contra con respecto al diagnóstico de la corioamnionitis histológica y al parto pretérmino y aunque son escasos los estudios en suero materno, se ha establecido una relación estrecha entre los marcadores de estrés oxidativo y la inflamación, siendo ambos causantes de ambas entidades. Conclusiones: se recomiendan las determinaciones cuantitativas seriadas y el uso de la proteína C reactiva de alta sensibilidad en el seguimiento de estas patologías. Son pocos los estudios acerca del valor predictivo de los marcadores de estrés oxidativo para ellas.

Introduction: biomarkers determination allowing the early diagnose of histological chorioamnionitis and preterm birth is a scientific interest due to the complications for the newborn health and social repercussion that this two entities brings along. Despite the multiples studies carried out about this issue, there are not biomarker which can efficiently predict both pathologies yet. Objectives: the current literature review was intended to address the possible relationship and use in diagnosing of two maternal serum biomarkers: C-reactive protein and oxidative stress markers, with regard to histological chorioamnionitis and preterm delivery. Methods: a search was made in Pubmed, Hinari, Scielo and Lilac's data bases. Results: although C-reactive protein in maternal serum is routinely used as a marker in monitoring clinical chorioamnionitis in the literature, there are studies favoring and against the diagnosis of histological chorioamnionitis and childbirth preterm and although there are few studies on maternal serum, a close relationship has established between inflammation and oxidative stress markers, both are cause these entities. Conclusions: the serial quantitative determinations and the use of high sensitivity CRP are recommended in monitoring these pathologies. There are few studies on the predictive value of oxidative stress markers for them.

Relación de las citoquinas proinflamatorias con la corioamnionitis subclínica y el parto pretérmino / Pro-inflammatory cytokines related to the subclinical chorioamnionitis and the preterm labor

El parto pretérmino es uno de los principales problemas de la obstetricia contemporánea pues representa una complicación obstétrica frecuente del embarazo y constituye una importante causa de muerte perinatal y de secuela a largo plazo del sobreviviente. Se plantea que es multicausal, aunque las evidencias sostienen que la infección uterina es su causa más frecuente. Niveles elevados de interleuquinas 1, 6, 8 y factor de necrosis tumoral alfa han sido detectados en el líquido amniótico de gestantes con infección uterina y dinámica uterina de origen idiopático, lo que nos incitó a revisar la relación existente entre las citoquinas proinflamatorias y la corioamnionitis subclínica causante de parto pretérmino y analizar si estas pueden ser utilizadas con carácter diagnóstico en estas entidades. Para ello se llevó a cabo una revisión bibliográfica en bases de datos como Pubmed, Scielo, Lilacs e Hinari. Según la bibliografía consultada, las citoquinas proinflamatorias son las responsables del desencadenamiento tanto del parto a término como el pretérmino, considerablemente más aumentadas en este último por estar casi siempre asociado a infección subclínica, la interleuquina 6 en líquido amniótico es el mejor marcador de infección intra-amniótica, que tienen el parto pretérmino y la rotura prematura de membrana. Concluimos que la determinación de las citoquinas proinflamatorias en líquido amniótico y suero materno pudiera resultar de utilidad en el diagnóstico precoz de la corioamnionitis histológica y en la prevención del parto pretérmino

The preterm labor is one of the main problems of the current obstetrics since it represents a frequent obstetric complication of pregnancy and it is a leading cause of perinatal death and also of long term sequelae in the survivor. It is propose that it is multicausal; although evidences support that the uterine infection is the more frequent one. High levels of interleukins 1, 6, 8 and the tumor necrosis factor alpha have been detected in the amniotic fluid of pregnants with uterine infection and idiopathic uterine dynamics, the authors made a review of the relation between pro-inflammatory cytokines and the cause of preterm delivery subclinical chorioamnionitis and also, to analyze if these may be used with a diagnostic character in these entities. Thus a bibliographic review was conducted in databases like Pubmed, Scielo, Lilacs and Hinari. According to the consulted bibliography, the pro-inflammatory cytokines are responsible for the triggering of the term labor and the preterm labor as well considerably more increased in this last one due to being almost always in association with a subclinic infection, the interleukin 6 in amniotic fluid is the better marker of intra-amniotic infection related to the preterm labor and the premature rupture of membranes. We concluded that the determination of pro-inflammatory cytokines in amniotic fluid and mother serum could be useful in the early diagnosis of the histological chorioamnionitis and in the prevention of preterm labor

Determinación de anticuerpos IgG contra el ADN de doble cadena mediante ELISA utilizando como recubrimiento ADN xenógeno y alógeno / Determination of IgG antibodies to double-chain DNA by ELISA using the xenogenic and allogenic DNA as coat

El ADN xenógeno empleado como recubrimiento de un inmunoensayo enzimático indirecto, para la determinación de anticuerpos IgG contra el ADN de doble cadena, es de difícil obtención y muy costoso. Por tal motivo, el objetivo del presente trabajo es evaluar la utilidad del ADN alógeno como antígeno de recubrimiento para detectar estos anticuerpos. Se empleó como recubrimiento ADN de timo de ternera y ADN de 6 sujetos supuestamente sanos. El análisis de la presencia de los anticuerpos se realizó en suero de 16 individuos con diagnóstico de Lupus Eritematoso Sistémico. Se obtuvo un 100por ciento de coincidencia en los resultados, así como pocas diferencias en la capacidad de discriminación del método con el empleo de los dos tipos de ADN. Según lo anterior se concluye que el ADN humano es útil como recubrimiento de este enzimoinmunoensayo. La obtención de dicho antígeno es menos costosa que la del ADN de timo de ternera.

Obtaining of the xenogenic DNA used as coat of a indirect enzymoimmunoassay, to determine IgG antibodies to double-chain DNA is difficult, and also it is very expensive. Thus, aim of this paper is to valuate usefulness of allogenic DNA as coat antigen to detect these antibodies. As coat we used DNA from calf thymus, and DNA from 6 subjects supposedly healthy. Analysis of presence of antibodies war carried out in sera from 16 individuals with diagnosis of systemic lupus erythematosus. There was a 100 percent of coincidence in results, as well as a few differences in discrimination ability of method using the two types of DNA. According above mentioned, we conclude that human DNA is useful as coat of this enzymoimmunoassay. Achievement of such antigen is less expensive than that of DNA from calf thymus.

Determinación de anticuerpos IgG contra el ADN de doble cadena mediante ELISA utilizando como recubrimiento ADN xenógeno y alógeno / Determination of IgG antibodies versus dsDNA by ELISA using xenogenous and halogenous DNA coating

Se evaluó la utilidad del ADN alógeno como antígeno de recubrimiento para detectar los anticuerpos IgG contra el ADN de doble cadena. El ADN xenógeno empleado como recubrimiento de un enzimoinmunoensayo indirecto, para la determinación de estos anticuerpos, es de difícil obtención y muy costoso. Se empleó como recubrimiento ADN de timo de ternera y ADN de 6 sujetos supuestamente sanos. El análisis de la presencia de los anticuerpos se realizó en suero de 16 individuos con diagnóstico de lupus eritematoso sistémico. Se obtuvo 100 por ciento de coincidencia en los resultados, así como pocas diferencias en la capacidad de discriminación del método con el empleo de los 2 tipos de ADN. Según lo anterior se concluyó que el ADN humano es útil como recubrimiento de este enzimoinmunoensayo. La obtención de este antígeno es menos costosa que la del ADN de timo de ternera.

The usefulness of allogenous DNA as a coating antigen to detect IgG antibodies versus dsDNA was evaluated. The xenogenous DNA used as a coating of an indirect immunoenzimatic assay for determining these antibodies is difficult to obtain and very expensive. Calf thymus DNA and DNA from 6 apparently sound subjects was utilized for coating. The analysis of the presence of antibodies was made in serum from 16 individuals with diagnosis of systemic lupus erythematosus. 100 percent of coincidence was obtained in the results. A few differences in the discrimination capacity of the method with the use of two DNA types were observed. According to the above, it was concluded that human DNA is useful as a coating of this enzymoimmunoassay. The obtention of such antigen cost less than that of the calf thymus.

Dinamica de resuuesta inmune primaria y secundaria: modelo: anticuerpos anti hbs / Dynamics of the immune primary and secondary response: Model, antibodies HBS

Se estudió la cinética individual y colectiva de la dinámica de la respuesta inmune y sus categorías, utilizando como modelo la respuesta de anticuerpos contra el antígeno de superficie del virus productor de la hepatitis B. En estudiantes de Medicina latinoamericanos, de 20 años promedio, se cuantificó la permanencia de niveles de anticuerpos después de 3 años de un esquema completo de inmunización y se encontraron valores promedio de 168 UI/L, un incremento de 757 UI/L en 15 días post refuerzo, lo que permitió estudiar el índice de memoria / durabilidad que fue 5,5 y conocer el incremento en UI/L por día y por microgramo de antígeno: 29 UI/ µg de antígeno. Se estimó, a partir de los valores de durabilidad a los 3 años de vacunados, la intensidad de la respuesta post esquema, que fue 336UI/L; igualmente a partir de los valores alcanzados al analizar memoria, 925 UI/L, pronosticamos una seroprotección hasta 18 años más, es decir, hasta el 2023. Obtuvimos resultados preliminares de utilización del modelo cinético para estudio de inmunoeficiencia.

It was studied the individual and collective kinetics of the dynamics of the immune response and their categories using like a model the response of antibodies against the antigen of surface of the virus producing of the hepatitis B. In students of Medicine 20 years old average, a permanency of antibodies of 168 UI/L was observed, after 3 years of a complete outline of immunization, an increment of 757 UI/L in 14 days post booster, what allowed to study the index by memory / durability that was 5.5 and to know the increment in UI/L per day (54 UI/day) and for antigen micro-gramme: 37.8 UI/µg. It was considered, starting from permanency of antibodies to the 3 years of vaccination, the intensity of the response post schedule that was 336UI/L, equally starting from the values reached in the memory, 925 UI/L, we prognosis a seroprotection up to 18 years or more, that is to say up to the 2023. We obtained preliminary results of use of the kinetic pattern for immune-efficiency study.

Propuesta de la actividad enzimática como procedimiento analítico rector en la evaluación de conjugados / Proposal of the enzymatic activity as a ruling analytical procedure in the evaluation of conjugates

Se propuso el empleo de la determinación de la actividad enzimática sin mediación de la interacción antígeno-anticuerpo, como procedimiento analítico inicial en la evaluación de conjugados inmunoenzimáticos. Los conjugados empleados en los métodos inmunoenzimáticos deben ser evaluados una vez obtenidos y cada cierto tiempo. Como en estos procedimientos la señal que se obtiene depende del producto enzimático formado, sería ventajoso iniciar la evaluación determinando la actividad de la enzima independientemente de la del producto como conjugado. Se sugirió un método basado en la adición del conjugado de manera directa al soporte empleado para el inmunoensayo enzimático y seguidamente el sustrato de la enzima. Se incluyó la forma de interpretar los resultados y se concluyó que este es un proceder sencillo, que pudiera tener un papel rector en la evaluación de estos reactivos

Características morfológicas de huella vacunal del BCG en estudiantes de medicina / Characterization of the vaccination print with the BCG, administered at birth in students of Medicine

Con el objetivo de conocer la caracterización cuali-cuantitativa de la huella de la vacunación con el BCG administrada al nacimiento, como indicador de potencialidades inmunológicas de forma temporal o permanente, hemos realizado un trabajo en estudiantes de Medicina, de edades entre 18 y 20 años, Se identificó presencia o no de huella y se midieron los diámetros transversales y longitudinales de las lesiones residuales, y se informó el promedio de ambas lecturas. A un subgrupo, se le realizó cuantificación de anticuerpos anti HBs mediante método inmunoenzimático, después de dosis de refuerzo de 20 μgvacuna de hepatitis B. En 103 de 123 (83,7(por ciento) de los estudiantes que habían recibido el BCG, se logró identificar huella de la vacuna, con un diámetro promedio de7,74mm, DS de 3,85 y CV de 49,7(por ciento) Los factores inmunológicos que justifican la huella de la vacuna aplicada en condiciones standard y de buenas prácticas, tienen una base genética que es totalmente individual, que demuestra la gran desviación standard observada. En el grupo al que se cuantificó, anti HBs, todos tenían respuesta al BCG, y tuvieron también, una magnífica respuesta de memoria inmunológica al HBsAg (987±240 UI/L promedio). Nos proponemos, como parte de un proyecto de investigación de nuestro Centro, realizar estudios prospectivos a niños de diferentes edades; y donde no aparezca huella del BCG, estudiar respuesta inmune para otras vacunas del PAI

Inmunoglobulina anti-hepatitis B cubana como adyuvante biológico / The Cubananti-HBs immunoglobulinlike biological adjuvant

Con el objetivo de lograr una mayor protección contra la infección por el virus productor de la hepatitis B en individuos con alto riesgo de exposición y conociendo que con la administración conjunta de la inmunoglobulina hiperinmune específica (IGHB) y de la vacuna cubana recombinante contra hepatitis B, se logra mayor protección, estudiamos 33 adultos presuntamente sanos de ambos géneros con un rango de edad entre 20 y 50 años, trabajadores de un Contingente de la construcción, a quienes se les descartó por interrogatorio, patologías degenerativas, metabólicas, infecciosas e inmunodeficiencias, que fuesen susceptibles a la infección y que no hubiesen estado en contacto con el virus. Se conformaron dos grupos: uno de control,de 18 individuos, al que se le aplicó sólo la vacuna (20 mg por dosis) y un grupo de estudio de 15 individuos, al que se le suministró en un mismo preparado, la vacuna einmunoglobulina(120 UI /L), combinados, que se mezclaron inmediatamente antes de su aplicación, administradas por vía intramuscular. El esquema aplicado fue 0-1-4 semanas y se realizó una evaluación antes y a los 15 días de concluido el esquema. Se obtuvo 80(por ciento) de seroprotección en el grupo de estudio y 72 en el control. Pudiendo concluir que con la aplicación en un mismo preparado de la vacuna antihepatitis B y la IGHB como adyuvante biológico se logró una seroprotección adecuada y no se observaron efectos indeseables

Estudio de fase I de la gammaglobulina hiperinmune anti-hepatitis B, con criterios de exclusión o sin estos / Study of the phase I of antihepatitis B hyperimmune gammaglobulin with or without exclusion criteria

Se evaluó la seguridad fase I de la gamma hiperinmune producida en Cuba contra la hepatitis B, en una muestra de personas con antecedentes alérgicos y sin estos. Se realizó un estudio con los 7 lotes de gammaglobulina hiperinmune obtenida en el Centro Nacional de Hemoderivados con todas las características para ser aplicada al humano. Se hizo en 2 fases para cada uno de los lotes, en la primera se le administró gammaglobulina hiperinmune 200 UI, junto con la primera y segunda dosis de la vacuna anti-hepatitis B, a 10 convivientes para cada lote (70 sujetos sin antecedentes patológicos familiares ni personales de hipersensibilidad tipo I). En la segunda fase a 20 convivientes para cada lote (140 sujetos) se les realizó el mismo procedimiento en la administración de la gamma, pero en personas con antecedentes de hipersensibilidad tipo I. Todos los estudios de forma colectiva e individual fueron precedidos de conferencias impartidas por profesores incluidos en este trabajo, que concluyó con la obtención del consentimiento informado individual para todos los participantes. No se detectaron efectos indeseables ni locales ni sistémicos en ninguno de los participantes en el estudio. La inocuidad observada permitirá continuar con fases posteriores de estudios clínicos

Correlación del ADN y del antígeno de superficie del virus de hepatitis B en tejidos de animales transgénicos

Se estudió la presencia del ácido desoxirribonucleico (ADN) que codifica para el antígeno de superficie del virus de hepatitis B (AgsHB) en los tejidos de ratones híbridos de transgénicos/BALB-c donde se había expresado el fenotipo previamente. Los órganos extraídos se evaluaron por la técnica de inmunohistoquímica, por un ELISA cuantitativo y reacción en cadena de la polimerasa (RCP) para la detección del ADN viral. En los tejidos estudiados se encontró ADN viral, excepto en el intestino donde no se evidenció su presencia en ninguno de los especímenes. Con la técnica de inmunohistoquímica no se logró detectar expresión de la proteína viral en intestino, músculo y vesícula seminal, sólo muy baja expresión en cerebro. Mediante la técnica inmunoenzimática no se detectó AgsHB en músculo, intestino, cerebro y estómago. Al evaluar el suero de la totalidad de los animales por medio de la técnica inmunoenzimática y con la RPC, 100 % de los sueros fueron positivos.

A study was made on the presence of DNA coding for Hepatitis B surface antigen (HbsAg) in hybrid transgenic /Balb-c mice where the phenotype had not been expressed before. The extracted organs were evaluated by immunohistochemistry, by quantitative ELISA and polymerase chain reaction (PCR) for detecting viral DNA which was found in the studied tissues except for the intestines in which none of the species was evident. The immunohistochemical technique did not manage to detect the expression of viral protein in the intestines, muscles and seminal vesicle, only a very low expression of such protein in the brain. The immunoenzymatic technique did not detect HbsAG in muscles, intestines, brain or stomach. However, when evaluationg the sera of all the animals by immunoenzymatic technique and PCR, 10% pf tje sera were positive to viral DNA.

Método de inmunocomplejos específicos para detectar ADN del virus de hepatitis B en pacientes con antigenemias bajas

Se evaluó la influencia de las concentraciones de las partículas asociadas con el virus de hepatitis B desde el punto de vista inmunológico mediante la formación de inmunocomplejos específicos (ICE), se determinó el DNA antes y después de formado el inmunocomplejo. Se utilizaron 10 muestras serológicas de pacientes portadores crónicos con antigenemia baja (menos de 1 mg/mL), a las que se les realizó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (RCP) para detección del ADN viral. A cada muestra se le aplicó la técnica de ICE mediante un estándar de anticuerpos para su formación in vitro, se realizó una purificación con fenol cloroformo para ser procesado por RCP. La amplificación de las muestras con inmunocomplejos demostró que la técnica de ICE poseía capacidad de concentrar el antígeno y éste pudo ser detectado cuando no era posible determinar las concentraciones en una electroforesis de agarosa.

We evaluated the influence of the concentrations of particles associated with Hepatitis B virus from the immunologic viewpoint through the formation of specific antibody-antigen complexes, and also we determined DNA before and after the formation of the complexes. We used 10 serological samples of chronic carrier patients with low antigenemia(less than 1µg/mL) which were subjected to PCR for detecting viral DNA. The antibody-antigen complex technique was used in each sample through standard antibodies for the complex to be formed in vitro, then purification with phenol chrololform to be PCR-processed. The amplification of samples with the antibody-antigen complexes showed that this technique was able to concentrate antigens, so it could be detected when it was impossible to determine antigen concentrations in an agar electrophoresis.

Inmunogenicidad de la vacuna cubana recombinante heberbiovac HB en modelos experimentales y aplicados al humano

Uno de los pilares fundamentales en el control, la eliminación y posible erradicación de la hepatitis viral tipo B-D es la utilización de la vacuna de producción cubana contra la hepatitis B. Se desarrollaron modelos experimentales y aplicados al humano que permitieron el estudio de inmunogenicidad mediante distintas vías, dosis y esquemas. Se trabajó experimentalmente se trabajó con ratones BALB/c, con la aplicación de 1 mg/dosis por vía intramuscular (IM) e intraperitoneal (IP) en 3 esquemas diferentes 0-1-2, 0-1-4 y 0-4-8 semanas. La inmunogenicidad se estudió mediante la cuantificación del anticuerpo contra el antígeno de superficie (AgsHB), con la aplicación de un método inmunoenzimático. En todos los animales hubo seroconversión con los esquemas 0-1-4 y 0-4-8 semanas. En el esquema 0-1-2 la vía IP resultó más inmunogénica que la vía IM, produjeron 60 y 35 % de seroconversión, respectivamente. La vía IP tuvo un coeficiente de variación menor cuando se compararon los esquemas 0-1-4 y 0-4-8 semanas, de todas formas resultó alto para ser animales BALB/c. En humanos se inmunizaron estudiantes de medicina y enfermería con el empleo de 20 mg/dosis por vía IM y 2 mg/dosis vía intradérmica (ID), con los esquemas 0-1-4 y 0-4-8 semanas; se demostró que la seroprotección e hiperrespuesta era mayor en el esquema 0-4-8 independientemente de la vía utilizada y que el esquema 0-1-4 no produjo la inmunogenicidad requerida por lo que debe ser utilizado de manera excepcional. Se obtuvieron estándares de anticuerpos nacionales para la aplicación en métodos de cuantificación de anti-AgsHB, tanto en estudios experimentales como en humanos.

One of the fundamental pillars in the control, elimination and possible eradication of B-D viral hepatitis is the use of the Cuban-made hepatitis B vaccine. Experimental models as well as models for humans were developed to study immunogenicity using various routes of administration, doses and schedules. Balb/c mice were used on experimental basis to which 1 mg/dose were administered by intramuscular(IM) and intraperitoneal (IP) within three different vaccination schedules, i,e, at 0, 1, and 2 weeks; 0, 1 and 4 weeks, and 0, 4 and 8 weeks. Immunogenicity was stufied through quantification of antibodies to surface antigens by using an immunoenzymatic method. Seroconversion was present in all animals at 0, 1 and 4 and 0, 1, and 8 weeks schedule. However, in 0, 1 and 2 schedule, IP route of administration was more immunogenic than IM, with 60% and 35% seroconversion respectively. IP route had a lower variation coefficient than 0, 1 and 4 week and 0, 4 and 8 schedules were compared, but anyway, it was high even for Balb/c animals. Medical and nursing students were immunized with 20 mg/dose IM and 2mg/dose intradermally within 0, 1 and 4 week and 0,4 and 8 w schedules. It was showed that seroprotection and hyperesponse were greater in 0, 4 and 8 week vaccination schemes regardless of the route of administration and that 0, 1 and 4 w schedule does not bring required immunogenicity, therefore, it should be used exceptionally. National antibody standards were obtained to be applied in anti-HbsAg quantification methods both in experimental and human-based studies.

Efectividad absoluta y relativa de la vacunación antihepatitis B en niños de Quillabamba, Perú, 1997-1999

Conociendo la importancia que la Organización Panamericana de la Salud le concede a la hepatitis B como problema de salud en algunas regiones de América del Sur y atendiendo a las recomendaciones de la comisión responsable del control de este tipo de hepatitis en el Perú, el Ministerio de Salud de este país inició en 1996, la vacunación de menores de 1 año en áreas de alta e intermedia endemicidad. En este trabajo se realizó un estudio concurrente de 115 niños inmunizados con la vacuna Heberbiovac HB (10 µg/dosis, 0-2-4 meses) integrada al Programa Ampliado de Inmunizaciones en Perú y 77 niños no vacunados. A todos se les realizó estudio serológico para conocer prevalencia de infección y de portadores del VHB ( AgsHB y anti-AgcHB) y cuantificación del anti-AgsHB, con el uso de métodos inmunoenzimáticos de la Organon Teknika. En ninguno de los niños vacunados existió evidencia de infección por el virus B, para una efectividad de 100 %. Los porcentajes de seroconversión, seroprotección e hiperrespuesta entre los vacunados fueron de 99,1, 98,3 y 42,6 respectivamente. Entre los no vacunados se encontraron marcadores de infección anterior en 31,1 % y 3,9 % fue positivo al AgsHB. Teniendo en cuenta la edad promedio de aparición de los marcadores y los niveles del AgsHB se pudo pensar que predominaba un patrón de trasmisión horizontal que ameritaba el estudio de conviventes y la evaluación de vías inaparentes de infección. A partir del impacto obtenido con la vacunación, se recomendó vacunar a todos los niños que lo necesitaban aunque se encontraran fuera del rango de edad establecido por el Programa Ampliado de Inmunización, así como a los conviventes donde se demostró circulación viral.

Knowing the importance that the Pan-American Health Organization gives to Hepatitis B as a health problem in some regions of South America and bearing in mind the recommendations of the commission in charge of the control of this hepatitis in Peru, the Ministry of Health in this country started a mass vaccination of under one year-old infants in highly and medium endemic areas. This paper sets forth a concurrent study of 115 children immunized with Heberbiovac HB (10 µg/dose, at 0, 2 and 4 months) which incorporated the Extended Immunization Program in Peru and 77 non-vaccinated children. All of them were serologically analyzed to find out prevalence of infection and of HBV carriers (HbsAg and anti-HbcAg) and their anti-HbsAG was quantified using immunoenzymatic methods of Organon Teknika. There was no evidence of virus B infection in the children accounting for 100 % effectiveness. The percentages of seroconversion, seroprotection and hyperesponse among the immunized children were 99.1, 98.3 and 42.6 respectively. Markers of previous infection were found in 31.1 % of children and 3.9 were HbsAg positive. Considering the average age at which markers occur and the levels of HbsAg, it was thought that a pattern of horizontal transmission predominates, which supports the study of people living in the same place as the infested subject and the assessment of non-evident route of infection. On the basis of the impact of vaccination, it was recommended to immunize all children in need of, even if they are not included in the age range set for the Extended Immunization Program as well as to people living with these children if viral spread is detected.

Eficacia comparativa de las vías intradérmica e intramuscular en la inmunización activa contra la hepatitis B: resultados a largo plazo / Comparative efficacy of intradermally and intramuscular routes for active immunization against hepatitis B: long-term results

Se presentan los resultados a largo plazo de un estudio prospectivo, comparativo y randomizado con 119 voluntarios jóvenes sero-negativos, con riesgo aumentado de infección por el VHB, que evaluó la inmunogenicidad comparativa de una vacuna recombinante contra la hepatitis B, administrada por vía intramuscular (IM) o intradérmica (ID). La vacuna fue administrada en tres dosis consecutivas, en un esquema de inmunización de corta duración de 0,1 y 2 meses. Una dosis de refuerzo fue administrada al cabo de 1 año, por la misma vía utilizada en la inmunización original. La distribución por edad y sexo en ambos grupos fue similar. Los resultados obtenidos al cabo de las tres dosis mostraron tasas de seroconversión y seroprotección similares para ambos grupos (96 por ciento y 96 por ciento para la vía IM Vs. 98 por ciento y 93 por ciento para la vía ID, respectivamente). El promedio geométrico del título de anti-HBsAg en el suero de los individuos inmunizados por vía IM (155 UI/L) fue significativamente superior al obtenido en aquellos inmunizados por vía ID (71 UI/L). Por otro lado, la tasa de buenos respondedores (niveles de anti-HBsAg >100 UI/L ) fue igualmente más elevada en los vacunados por vía IM (67 por ciento Vs. 39 por ciento). El porcentaje de buenos respondedores en las mujeres fue consistentemente superior al de los varones para ambos grupos (75 por ciento Vs. 55 por ciento vía IM y 54 por ciento Vs. 13 por ciento vía ID, respectivamente). En 82 individuos estudiados 1 años más tarde, el promedio geométrico de los niveles de anti-HBsAg fue significativamente superior en los que recibieron la vía IM (278 UI/L) en comparación con los vacunados por vía ID (82,3 UI/L) y la tasa de seroprotección fue también superior (100 por ciento Vs. 84,8 por ciento respectivamente). De la misma manera, la respuesta de anti-HBsAg sérica a la dosis de refuerzo, fue mejor en los vacunados por vía IM (promedio geométrico 5.090 UI/L) con respecto a los que recibieron la vía ID.

Estudio del efecto irritativo de los jabones para piel delicada / Study of the irritative effect of soaps on sensitive skin

La elección de un jabón sobre otro depende principalmente de preferencias individuales, sin embargo, el tipo de piel que tiene cada paciente influye en esta elección. En este estudio investigamos el efecto irritativo de los jabones utilizados para la piel delicada. Se expusieron 15 sujetos de piel sensible (con prueba del parche positiva para lauril sulfato de sodio al 0.13 por ciento) a emulsiones de jabón al 8 por ciento durante cinco días seguidos y se registró la aparición de eritema, descamación y fisuración. De esta manera se evaluaron 22 jabones y sustitutos de jabón. Además se estudiaron las características de cada producto, su pH, contenido de detergentes, perfume y exceso de grasa. Los resultados indicaron que la mayor parte de los jabones y sustitutos de jabón poseen un pH demasiado alcalino, y que una gran cantidad de ellos no reúnen las característicasadecuadas para rotularse como jabones neutros y mucho menos útiles para piel sensible. Sin embargo, cinco de ellos prácticamente no produjeron irritación. Podemos concluir que en nuestri país contamos con productos adecuados para el aseo cotidiano en personas con piel sensible

Eficacia comparativa de las vías intradérmica e intramuscular en la inmunización activa contra la hepatitis B con una vacuna recombinante: resultados preliminares / Hepatitis B immunizantion: comparative effectiveness of intradermal vs. intramuscular administration of a recombinat vaccine: prelimminary results

Se presentan los resultados iniciales de un estudio prospectivo, comparativo y randomizado en 119 voluntarios jóvenes sero-negativos, con riesgo aumentado de infección para la hepatitis B, dirigido a evaluar la inmunogenicidad comparativa de una vacuna recombinante contra la hepatitis B (heberbiovac HB), administrada por vía intramuscular (IM) o intradérmica (ID). La vacuna fue administrada en tres dosis consecutivas, según un esquema de inmunización de corta duración de 0,1 y 2 meses. La distribución por edad y sexo en ambos grupos fue uniforme. Los resultados obtenidos al cabo de las tres dosis mostraron tasas de seroconversión y seroprotección similares para ambos grupos (96 por ciento y 96 por ciento Vs 98 por ciento y 93 por ciento , respectivamente). La media geométrica del título de anti-HBsAg en los individuos inmunizados por vía IM (155 UI/L) fue marcadamente superior al obtenido en aquellos inmunizados por vía ID (71 UI/L). Por otro lado, la tasa de buenos respondedores (niveles de anti-HBsAg > 100 UI/L) fue igualmente más elevada en los vacunados por vía IM (67 por ciento Vs. 39 por ciento ). El porcentaje de buenos respondedores en las mujeres fue consistentemente superior al de los varones para ambos grupos (75 por ciento Vs. 55 por ciento vía IM y 54 por ciento Vs. 13 por ciento vía ID, respectivamente). En 68 vacunados, se obtuvieron muestras de suero un año más tarde. Los niveles de anti HBsAg y la respuesta anamnésica después de un refuerzo de la vacuna, están siendo determinados en la actualidad, a fin de medir el mantenimiento de la respuesta inmunológica en el tiempo